饲料中烟酸的测定
1 仪器及试剂
1.1仪 器
1). 分析天平一台（精度0.1mg）；
2). 超声波清洗机一台；
3). 溶剂过滤器（含泵）一套；
4). 微量进样器（100µl）一支；
5). 离心机一台；
6). 等度高效液相色谱仪；
1.2试 剂
1). 实验使用水；
2). 甲醇，色谱纯；
3). 三乙胺；
4). 冰乙酸；
5). 己烷磺酸钠；
6). 烟酸标准品：含量≥99%；
7). 烟酸标准贮备液；
8). 烟酸标准工作液；
1.3 标准溶液配制
烟酸标准贮备液：称取经过干燥的烟酸标准纯品25.0 mg，置于250ml棕色容量瓶中，用移动相溶解，稀释至刻度，于冰箱保存，可放置一周。
烟酸标准工作液液：准确吸取烟酸标准贮备液10ml用流动相稀释至50ml或100ml标准溶液置于带盖小瓶贮存，供液相色谱仪分析用，当日使用。
提取液：取500ml离子水，加10ml乙酸，1.3ml三乙胺，用去离子水定容至1L，此时pH为3.2，过0.45 µm滤膜，取上述溶液850mL与150ml醇混合。
2%的乙腈磷酸缓冲液：称取4.84 g 的磷酸氢二钾，9.82g 磷酸二氢钾溶于去离子水中，加20 ml乙腈，用去离子水定容至1 L，混匀用20%氢氧化钾调节pH至6.5。
碳酸钠溶液:c(Na2CO3)=0.1 mol/L。
2 样品制备
称取试样维生素预混料0.5-1g或复合预混料1-5g精确至0.0001g。置于100ml的棕色容量瓶中，加入10ml碳酸钠溶液，浸湿试样加70ml提取液混匀，于超声波水浴中振荡提取15min，用提取液定容至刻度，混合均匀，过滤或离心。再经0.45µm滤膜过滤，进样测定。
3 色谱条件
色谱柱： C18色谱柱 250mm×4.6mm×5μm；
流动相：2%的乙腈磷酸缓冲溶液；
流速：1.4mL/min；
温度：室温；
进样量：20μL；
检测波长：280nm。
4 色谱图
